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超滤离心管的保养

      超滤离心管是内部装有超滤膜的用于浓缩和净化生物样本的一次性耗材。15ml的超滤离心管可处理样品量达20ml,具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。

      浓缩蛋白时超滤离心管的处理:超滤离心管可以重复使用,用0.1M的NaOH浸泡1-2h,用水清洗,再在离心机上用相关溶液(灭菌水或PBS)清洗3次,即可用于浓缩新的蛋白;(注:清洗过程不可马虎)。

      经常使用的超滤离心管的放置:使用频率高的超滤离心管,应放置在用0.1M的NaOH溶液浸泡1-2h,用水清洗,用灭菌水浸泡,务必保持滤膜润湿,不能长菌;(注:常检查,多清洗。)

      不常用的超滤离心管的处理:使用率不高的超滤离心管,应放置在用0.1M的NaOH溶液浸泡1-2h,用水清洗,用20%的乙醇浸泡保存,务必保持滤膜润湿,不能长菌;(注:常检查)。

      超滤离心管使用的离心转速: 离心机转速一般采用4000rpm(一般建议为3000g,不能超过4000g)离心5-8分钟,即可将4ml样品浓缩至1ml以下至几十微升;速度过高,目的蛋白会离下,导致目的蛋白丢失;速度过低,耗时,工效低;

      使用吸头伸入超滤离心管时应注意: 加入Buffer或者蛋白液到超滤离心管里面,可以用蓝吸头(1000ul),但从超滤管底吸取浓缩好的目的蛋白时,必须用黄吸头(200ul);伸入超滤管中时,必须防止碰到滤膜,以免戳破滤膜;

      减少使用超滤离心管对蛋白的吸附损失:超滤离心管的滤膜会吸附蛋白,能导致目的蛋白减少,高可达30%左右;为减少蛋白损失,在吸尽目的蛋白液后,再用蛋白Buffer吹洗超滤管的管底,可以将滤膜吸附的蛋白洗下大部分而减少目的蛋白的损失;一般无论如何离心,底部会保留有200 ul左右的蛋白液;

      如何界定超滤离心管是否失效:超滤离心管在正常使用下,滤膜没有被戳破时,浓缩蛋白液中不含有蛋白或量很低(包括目的蛋白),而滤下液中含有目的蛋白,则说明滤膜失效,需要换新的超滤管。

      以上就是登宁为大家分享的关于超滤离心管的保养方法了,如有疑问或是补充欢迎来电咨询!

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